Як інтерпретувати тест ELISA?

ELISA (імуноферментний аналіз) — це експериментальний метод, який зазвичай використовується для виявлення та кількісного визначення білків, гормонів, антитіл та інших молекул. Нижче ми тлумачимо метод ІФА з трьох аспектів: основні принципи, визначення результату та запобіжні заходи:

1. Основний принцип: ІФА базується на специфічному зв'язуванні антиген-антитіло. Зазвичай відоме антитіло або антиген фіксують на мікропланшеті, а потім додають зразок для дослідження. Якщо зразок, який потрібно перевірити, містить відповідне антитіло або антиген, вони зв’яжуться з фіксованою молекулою. Потім додайте вторинне антитіло, помічене ферментом, який має спорідненість до досліджуваної речовини. Нарешті, додайте субстрат ферменту, і відбудеться кольорова реакція. За глибиною кольору або інтенсивністю світіння можна кількісно або якісно визначити концентрацію досліджуваної речовини.

2. Визначення результату: Якісний ELISA: просто визначте, чи присутня цільова молекула у зразку. Якщо є кольорова реакція, це означає наявність досліджуваної речовини. Кількісний ELISA: кількісно визначте досліджувану речовину, побудувавши стандартну криву. Спочатку використовуйте стандартну речовину з відомою концентрацією для проведення ELISA для отримання серії кольорових реакцій. Потім намалюйте стандартну криву на основі цих точок даних. Концентрацію досліджуваного зразка можна отримати шляхом порівняння його інтенсивності забарвлення зі стандартною кривою.

3. Запобіжні заходи: операцію слід стандартизувати, щоб зменшити перехресне забруднення та помилки. Переконайтеся, що всі реагенти та обладнання знаходяться в хорошому стані. Побудова та визначення стандартної кривої має бути точним, щоб забезпечити точну концентрацію досліджуваного зразка.